Gélová elektroforéza je jednou z hlavných metód používaných v molekulárnej biológii na analýzu DNA.Táto metóda zahŕňa migráciu fragmentov DNA cez gél, kde sú oddelené na základe veľkosti alebo tvaru.Stretli ste sa však niekedy s chybami počas vašich elektroforéznych experimentov, ako sú rozmazané pásy na agarózovom géli alebo žiadne pásy na géli?Čo môže byť príčinou týchto chýb?
Naši technici tu pre vašu referenciu zhrnuli pár riešení problémov.
1. Rozmazané pásy na agarózovom géli
●DNA bola degradovaná.Zabráňte kontaminácii nukleázou.
● Pufor na elektroforézu nie je čerstvý.Po opakovanom použití elektroforetického tlmivého roztoku klesá iónová sila a zvyšuje sa jeho hodnota pH, čím sa znižuje kapacita tlmivého roztoku, čo ovplyvňuje účinok elektroforézy.Odporúča sa často vymieňať elektroforézny pufor.
● Boli použité nesprávne podmienky elektroforézy.Nedovoľte, aby napätie prekročilo 20 V/cm a počas elektroforézy udržujte teplotu < 30 °C.Pri elektroforéze s obrovským reťazcom DNA by teplota mala byť <15 °C. Skontrolujte, či má tlmivý roztok pre elektroforézu dostatočnú kapacitu.
● Na gél bolo nanesených príliš veľa DNA.Znížte množstvo DNA.
● Príliš veľa soli v DNA.Na pokročilé odstránenie nadbytočných solí použite zrážanie etanolom.
● DNA bola kontaminovaná proteínom.Použite fenolové extrakcie na odstránenie bielkovín v pokročilom štádiu.
● DNA bola denaturovaná.Pred elektroforézou nezahrievajte.Zrieďte DNA v pufri s 20 mM NaCl.
2. Anomálie migrácie pásov DNA
• Renaturácia COS miesta fragmentu λHind III.Pred elektroforézou zohrejte DNA 5 minút pri teplote 65 °C a potom ju 5 minút ochlaďte na jednotke s ľadom.
● Boli použité nesprávne podmienky elektroforézy.Nedovoľte, aby napätie prekročilo 20 V/cm a počas elektroforézy udržujte teplotu < 30 °C.Skontrolujte, či má tlmivý roztok pre elektroforézu dostatočnú kapacitu.
● DNA bola denaturovaná.Pred elektroforézou nezahrievajte.Zrieďte DNA v pufri s 20 mM NaCl.
3. Slabé alebo žiadne pásy DNA na agarózovom géli
● Na géli bolo nanesené nedostatočné množstvo alebo koncentrácia DNA.Zvýšte množstvo DNA.Elektroforéza na polyakrylamidovom géli je o niečo citlivejšia ako elektroforéza na agaróze a zaťaženie vzorky sa môže primerane znížiť.
● DNA bola degradovaná.Zabráňte kontaminácii nukleázou.
● DNA bola elektroforézovaná z gélu.Elektroforézujte gél kratšiu dobu, použite nižšie napätie alebo použite gél s vyšším percentom.
● Na vizualizáciu DNA zafarbenej etídium bromidom bol použitý nesprávny zdroj svetla W.Pre vyššiu citlivosť použite krátkovlnné (254 nm) W svetlo.
4. Chýbajúce pásy DNA
●DNA malej veľkosti bola z gélu elektroforézou.Elektroforézujte gél kratšiu dobu, použite nižšie napätie alebo použite gél s vyšším percentom.
● Je ťažké rozlíšiť pásy DNA podobných molekúl.Zvýšte čas elektroforézy a skontrolujte koncentráciugélu, aby ste sa uistili, že sa použije správne percento gélu.
● DNA bola denaturovaná.Pred elektroforézou nezahrievajte.Zrieďte DNA v pufri s 20 mM NaCl.
● Reťazce DNA sú obrovské a konvenčná gélová elektroforéza nie je vhodná.Analyzujte pomocou pulznej gélovej elektroforézy.Aké ďalšie problémy ste mali s elektroforézou na agarózovom géli?V budúcnosti budeme viac hľadať sprievodcov.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) je špecializovaná spoločnosť so zameraním na produkty súvisiace s elektroforézou v Číne.Jeho príbeh sa začína v roku 1970, keď Čína ešte nevstúpila do reformného a otváracieho času.Vďaka dlhoročnému vývoju má Liuyi Bitotech svoju vlastnú značku, ktorá je na domácom trhu produktov elektroforézy známa ako značka Liuyi.
Značka Liuyi má v Číne viac ako 50-ročnú históriu a spoločnosť môže poskytovať stabilné a vysokokvalitné produkty po celom svete.Vďaka dlhoročnému vývoju si zaslúži vašu voľbu!
Horizontálne elektroforézne články (nádrže/komory) Liuyi Biotech sú vysoko kvalitné s dobrým vzhľadom.S rôznymi veľkosťami gélových podnosov môžu splniť vaše rôzne experimentálne požiadavky.Máme vlastný technický tím a továreň.Od návrhu po výrobu, suroviny až po kľúčové časti, môžeme kontrolovať celý proces.Séria DYCP 31 je určená na elektroforézu DNA, ktorá je modelomDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, aDYCP-31E.Rozdiely medzi nimi sú veľkosti gélu a cena.Pre našich zákazníkov poskytujeme produkty v plnej veľkosti.ModelDYCP-32Cdokáže vyrobiť najväčší gél 250 mm * 250 mm.
Medzitým odporúčame náš napájací zdroj pre elektroforézuDYY-6C,DYY-6DaDYY-10Cpre naše elektroforézne články (nádrže/komory) série DYCP-31 a 32.
Ak chcete viac informácií o produktoch, navštívte túto webovú stránku a získajte viac. Vitajte, ak nás kontaktujte e-mailom, aby ste nám dali vedieť, čo chcete, a zistite, či vám môžeme poskytnúť riešenia.
Pre viac informácií o nás nás prosím kontaktujte emailom[e-mail chránený], [e-mail chránený].
Čas odoslania: máj-09-2022