Príprava agarózového gélu na elektroforézu

Príprava agarózového gélu na elektroforézu

Poznámka: Vždy používajte jednorazové rukavice!

Pokyny krok za krokom

Váženie agarózového prášku:upapier na váženie a elektronické váhy na odmeranie 0,3 g agarózového prášku (na základe 30 ml systému).

Príprava vyrovnávacej pamäte TBST:ppripravte 30 ml 1x TBST pufra v 100 ml Erlenmeyerovej banke.

Rozpustenie agarózového prášku:pagarózový prášok do TBST pufra a dobre pretrepte.Vložte ichdo mikrovlnnej rúry a zahrievajte (zvyčajne 50 sekúnd, prikryté hliníkovou fóliou), kým sa úplne nerozpustí.

Chladenie a pridávanie nukleázy:uv rukaviciach vyberte zmes z mikrovlnnej rúry a nechajte ju mierne vychladnúť v studenej vode, kým nebude teplá (približne 60 °C). Za stáleho trepania pridajte 2 µl nukleázy (náhrada Eb), aby sa zmes dôkladne premiešala.

Príprava gélovej formy:

• Coprieť a vysušiťtácka na gél a zariadenie na odlievanie géluelektroforetickej nádrže.
•  Pčipka gélzásobníkdo vnútornej nádrže a hrebeň zasuňte do pevnej polohy.
• Roztok agarózového gélu ochladený na asi 65 °C premiešajte a opatrne nalejte nagélový zásobníkvzariadenie na odlievanie gélu, pomaly rozotierajte, kým sa na sklenenej doske nevytvorí rovnomerná gélová vrstva.
• Nechajte stáť pri izbovej teplote, kým gél úplne nestuhne.
• Jemne odstráňte hrebeň vertikálne a odstráňte pásku.
• Umiestnite gélzásobníkdo elektroforetickej nádoby.

Dôležité: Uistite sa, že v oblasti zubov hrebeňa nie sú žiadne vzduchové bubliny. Povrch kvapaliny by mal byť hladký bez zvlnenia.

Spustenie gélu

Nabíjanie gélu

Po stuhnutí gélu ho vložte do elektroforetickej nádoby a nalejte elektroforézny pufor, kým nie je gél ponorený.

Príprava vzoriek

• Vyberte značkovač a nakladací tlmivý roztok z chladničky.
• K vzorkám pridajte 6 µl nanášacieho pufra a dobre premiešajte.
• Pomocou mikropipety pomaly vložte vzorky do veľkých jamiek gélu (dávajte pozor, aby ste gél neprepichli a nevyčerpali celý objem, aby nevznikli vzduchové bubliny).
• Vložte marker do ktorejkoľvek z malých jamiek (zapamätajte si jeho polohu).

Spustenie elektroforézy

• Nádrž na elektroforézu prikryte a ihneď po vložení gélu začnite elektroforézu.
• Nastavte napätie na 60-100V. Vzorky budú migrovať zo zápornej elektródy (čierna) na kladnú elektródu (červená).
• Vyššie napätie skracuje účinný rozsah separácie agarózového gélu.
• Zastavte elektroforézu, keď farbivo brómfenolovej modrej dosiahne približne 1 cm od spodného okraja gélovej platne.

Pozorovanie výsledkov

Po oddelení pásov zastavte elektroforézu, vyberte gél a priamo ho detegujte a fotografujte.

Na fotografovanie a pozorovanie pásov použite gélový zobrazovací systém (skontrolujte, či existujú nejaké pásy pre marker alebo vzorky).

Po získaní mapy gélového pásu nájdite značku. Na základe značky môžete určiť cieľové pásma!

Spoločnosť Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) vyrába produkty elektroforézy už viac ako 50 rokov. Predstavujeme tu naše systémy horizontálnej elektroforézyagarózový gélelektroforéza.Vyberte sihorizontálne elektroforézne systémyz Pekingu liuyi za váš experiment s gélovou elektroforézou, ktorý pomôže vášmu výskumu v biotechnologickom priemysle.

Ponúkame rôzne modely horizontálnych elektroforéznych nádrží na odlievanie a prevádzku malých rozmerovagarózagély na veľkéagarózagély

Sprievodca výberom jednotky horizontálnej ponorenej gélovej elektroforézy

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) sa špecializuje na výrobu elektroforéznych prístrojov už viac ako 50 rokov s vlastným profesionálnym technickým tímom a R&D centrom. Máme spoľahlivú a kompletnú výrobnú linku od návrhu po kontrolu a sklad, ako aj marketingovú podporu. Naše hlavné produkty sú elektroforéza Cell (nádrž/komora), elektroforézny zdroj napájania, Blue LED Transiluminator, UV Transiluminator, Gel Image & Analysis System atď. Dodávame aj laboratórne prístroje ako PCR prístroj, vortexový mixér a odstredivka pre laboratórium.

Ak máte nejaký plán nákupu pre naše produkty, neváhajte nás kontaktovať. Môžete nám poslať správu na email[chránený e-mailom]alebo[chránený e-mailom], alebo nám zavolajte na číslo +86 15810650221 alebo pridajte Whatsapp +86 15810650221, alebo Wechat: 15810650221.

Naskenujte QR kód a pridajte ho na Whatsapp alebo WeChat.