DNA gélová elektroforéza je bežná technika molekulárnej biológie používaná na separáciu a analýzu fragmentov DNA na základe ich veľkosti. Proces zahŕňa naloženie fragmentov DNA rôznych veľkostí na gél vyrobený z agarózy, čo je sacharid nachádzajúci sa v červených riasach.
Príprava a odlievanie agarózového gélu
- Agarózu rozpustite vo vhodnom množstve tlmivého roztoku na elektroforézu. Koncentrácia gélu je určená pomerom hmotnosti k objemu, ako je 1 g agarózy v 100ml pufra na 1% gél.
- Zmes zohrejte v mikrovlnnej rúre, pričom nádobou otáčajte, aby sa zabezpečilo úplné rozpustenie agarózy.
- Do roztoku gélu sa pridá etídiumbromid na konečnú koncentráciu 0,5mg/ ml. Etídiumbromid interkaluje medzi susednými pármi báz DNA a pod UV svetlom vyžaruje oranžovú fluorescenciu. Upozorňujeme, že etídiumbromid je karcinogén, takže manipulácia s ním si vyžaduje správne bezpečnostné opatrenia, ako je nosenie rukavíc.
- Gélový roztok ochlaďte vo vodnom kúpeli, aby ste zabránili deformácii gélovej vaničky v dôsledku vysokých teplôt.
- Umiestnite hrebeň do gélového roztoku, aby ste vytvorili vzorkové jamky. Vyberte hrebene vhodné pre množstvo vzorky DNA, ktorú budete nakladať. Nalejte roztok agarózového gélu dogélový zásobníka necháme stuhnúť pri izbovej teplote.
- Keď gél stuhne, hrebeň odstráňte. Ak gél nepoužijete okamžite, zabaľte ho do plastovej fólie a skladujte pri teplote 4 °C, kým nebudete potrebovať.
Príprava a spustenie gélu
Pred začatím elektroforézy zmiešajte vzorku DNA s nanášacím pufrom. Nanášací pufor je zvyčajne šesťkrát koncentrovanejší a pomáha vzorke klesnúť na dno jamiek a sledovať pohyb počas elektroforézy.
Nastavte napájací zdroj na špecifikované napätie.
Do nádržky na gél pridajte dostatočné množstvo elektroforézneho pufra, aby pokryl povrch gélu.Zaistitesprávne pripojenia elektród.
Vložte vzorku DNA a markery molekulovej hmotnosti do gélových jamiek.
Zapnite napájanie na spustenie elektroforézy.
Pozorovanie oddelených fragmentov DNA
Po elektroforéze vypnite napájanie a odstráňte gél.
Na osvetlenie gélu použite zdroj UV svetla; Fragmenty DNA sa objavia ako oranžové fluorescenčné pásy.
Zdokumentujte obrázok gélu na analýzu oddelených fragmentov DNA.
Po experimente zaistite správnu likvidáciu gélu a elektroforézneho pufra podľa laboratórnych pokynov. Pri manipulácii s gélmi a tlmivými roztokmi obsahujúcimi etídiumbromid vždy noste rukavice, aby ste sa chránili pred vystavením tejto nebezpečnej látke.
DNA gélová elektroforéza je široko používaná v molekulárnej biológii a genetickom výskume na odhad veľkosti molekúl DNA, separáciu DNA fragmentov, detekciu génových mutácií a DNA fingerprinting, okrem iných aplikácií. Je to jednoduchá a účinná experimentálna technika, ktorá pomáha pochopiť zloženie a vlastnosti vzoriek DNA.
Beijing Liuyi Biotechnology Co.Ltd, profesionálny výrobca so zameraním na produkty elektroforézy viac ako 50 rokov, ponúka rad elektroforéznych nádrží (komôr/článkov) pre gélovú elektroforézu, ako sú horizontálne elektroforézne nádrže (komory/články) preDNAgélová elektroforéza a vertikálne elektroforézne nádrže (komory/články) pre proteínovú gélovú elektroforézu. Medzitým poskytuje aj rôzne typy elektroforézneho napájacieho zdroja, analyzátor tmavej skrinky skrinky a UV transiluminátor. Na meranie molekulovej hmotnosti RNA a na oddelenie RNA rôznych veľkostí pre vaše laboratórium si môžete vybrať elektroforézne nádrže (komory/bunky) od Pekingu Liuyi.
Tu budemeodporučiťjeden typ modelu horizontálnej elektroforéznej nádrže (komora/článok).DYCP-31DN vytvoriť a spustiť gél.
Po spustení gélu môžete použiť náš model gélového obrazu a analýzyWD-9413Bpozorovať, analyzovať a fotografovať pre gél. Liuyi Biotech tiež ponúka UV transiluminátor (UV Analyzer) na pozorovanie gélu. Máme model UV transiluminátora typu black-box (UV Analyzer).WD-9403A,9403C,WD-9403F, model prenosného UV transiluminátora (UV Analyzer).WD-9403Ba ručný UV transiluminátor (UV analyzátor)WD-9403Elebo si vyberiete.
Značka Beijing Liuyi má v Číne viac ako 50-ročnú históriu a spoločnosť môže poskytovať stabilné a vysokokvalitné produkty po celom svete. Počas rokov vývoja si zaslúži vašu voľbu!
Teraz hľadáme partnerov, OEM elektroforézna nádrž aj distribútori sú vítaní.
Ak máte nejaký plán nákupu pre naše produkty, neváhajte nás kontaktovať. Môžete nám poslať správu na email[chránený e-mailom]alebo[chránený e-mailom], alebo nám zavolajte na číslo +86 15810650221 alebo pridajte Whatsapp +86 15810650221, alebo Wechat: 15810650221.
Čas odoslania: august-08-2023